Diagrama de Lineweaver-Burke

Fonte: testwiki
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A equação de Michaelis-Menten pode ser transformada algebricamente em equações mais práticas para fazer gráficos com dados experimentais. Quando [S] tem valores muito altos, a velocidade inicial V0 aproxima-se assintoticamente a Vmax. Na prática, entretanto, é muito difícil obter o valor de Vmax com precisão a partir dos gráficos de V0 versus [S]. Mesmo em concentrações tão altas de substrato como [S]=10 km, a equação indica que V0 é apenas 91% da Vmax de modo que o valor obtido pela extrapolação da assintota será, com toda certeza, subestimado.[1][2]

Uma transformação muito comum é deduzida simplesmente tomando as recíprocas dos dois lados da equação de Michaelis-Menten:

V0=Vmax[S]km+[S]1V0=km+[S]Vmax[S]

Separando os componentes do numerador no lado direito da equação obtém-se:

1V0=kmVmax[S]+[S]Vmax[S]

que é simplificado para[1][2]

1V0=kmVmax[S]+1Vmax

Gráfico duplo recíproco (Lineweaver-Burk)

Essa forma da equação de Michaelis-Menten é um método melhor para determinar os valores de Vmax e km, que foi formulado por Hans Lineweaver e Dean Burk, sendo a equação denominada Lineweaver-Burk. No caso das enzimas que obedecem a relação de Michaelis-Menten, um gráfico de 1V0 versus 1[S] (o “duplo-recíproco” de um gráfico de V0 versus [S] é usado) produz uma linha reta. Essa linha tem uma inclinação de Km/Vmáx no eixo 1V0 e uma intersecção de 1km no eixo 1[S].[1][2]

A representação duplo-recíproca, também denominada gráfico de Lineweaver-Burk, tem a grande vantagem de permitir uma determinação mais acurada de Vmax que pode ser obtida apenas aproximadamente nos gráficos simples de V0 versus [S]. No entanto, este gráfico tem uma desvantagem. Uma vez que a maioria das medições experimentais envolve concentrações relativamente altas de [S], os pontos, portanto, acumulam-se no lado esquerdo do gráfico. Assim, para valores pequenos de [S], pequenos erros na V0 levam a grandes erros em 1V0 e, consequentemente, a grandes erros em km e Vmax.[2]

Outras transformações da equação de Michaelis-Menten são feitas, cada uma com uma vantagem específica para a análise de dados cinéticos. Com o advento dos computadores, entretanto, os dados cinéticos são geralmente analisados por tratamentos estatísticos matematicamente sofisticados.[1]

Contudo, os gráficos de Lineweaver Burk são inestimáveis tanto para a apresentação visual dos dados cinéticos como também são úteis para analisar dados cinéticos de enzimas que usam mais do que um substrato.[1]

O gráfico duplo-recíproco das velocidades de uma reação enzimática é muito útil para diferenciar entre certos tipos de mecanismos de reação enzimática e na análise da inibição de enzimas.[2]

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  1. 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 Voet, Donald. Bioquímica. Artmed,2013
  2. 2,0 2,1 2,2 2,3 2,4 Princípios de Bioquímica de Lehninger. Nelson, David L. Artmed,2014